일반생물학 實驗 - Restriction Enzyme Digestion
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작성일 23-01-24 18:22
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생체 내에서는 필요에 따라 Nucleic acid를 합성하기도 하지만 때로는 분해도 한다. 분해의 방법 중 제일 대표적인 것은 없애야할 Nucleic acid를 잘라버리는 것이다. Nucleic Acid를 자른다는 것은 nucleotide들이 연결되어 있는 phosphodiester bond를 끊어내는 것을 의미한다. Nucleic Acid를 자른다는 것은 nucleotide들이 연결되어 있는 phosphodiester bond를 끊어내는 것을 의미한다.
다.
② 대칭면의 주위가 잘리는 경우 (sticky end, cohesive end, 5-overhang end)
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Restriction Enzyme의 이용
일반생물학,Restriction Enzyme Digestion
제한효소는 두 가지 class로 나뉜다. ① 대칭면의 중심이 잘리는 경우 (blunt end, flush end)
일반생물학 實驗 - Restriction Enzyme Digestion
type I 은 특별한 서열을 인식하지만 target site 이외의 다른 곳을 자르고 type II 는 인식한 범위 내에서만 자른다. Nucleic Acid를 자른다는 것은 nucleotide들이 연결되어 있는 phosphodiester bond를 끊어내는 것을 의미한다. 즉 6개의 염기서열을 인식한다면 理論(이론)상 46 = 4096 base pair 마다 한 번씩 출현하게 된다 제한효소가 인식할 수 있는 부위는 palindromic sequence, 즉 앞으로 읽으나 뒤로 읽으나 염기서열이 같은 모양을 하고 있는 것이 특징이다. 이런 역할을 하는 효소를 nuclease라고 하며 바깥쪽에서부터 자르는가 안쪽을 자르는가에 따라서 각각 exonuclease, endonuclease라고 부른다. 잘린 후의 DNA 모양은 5-overhang cohesive end, 3-overhang cohesive end(sticky end) 또는 blunt end가 만들어질 수 있으므로 목적에 따라서 잘 선택해서 사용해야 한다. 분해의 방법 중 제일 대표적인 것은 없애야할 Nucleic acid를 잘라버리는 것이다. 분해의 방법 중 제일 대표적인 것은 없애야할 Nucleic acid를 잘라버리는 것이다. 이런 역할을 하는 효소를 nuclease라고 하며 바깥쪽에서부터 자르는가 안쪽을 자르는가에 따라서 각각 exonuclease, endonuclease라고 부른다. 이런 역할을 하는 효소를 nuclease라고 하며 바깥쪽에서부터 자르는가 안쪽을 자르는가에 따라서 각각 exonuclease, endonuclease라고 부른다. 따라서 유전공학에서는 type II를 이용하고 있다
생체 내에서는 필요에 따라 Nucleic acid를 합성하기도 하지만 때로는 분해도 한다.
설명
Type II 가 두 개의 단일가닥을 자를 때 두 가지 형태의 잘린 단편이 나타난다.
대부분의 제한효소는 4개, 5개, 또는 6개의 염기서열을 인식하는데, 이에 따라 DNA 상에 인식부위가 나타나는 빈도가 달라진다.
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생체 내에서는 필요에 따라 Nucleic acid를 합성하기도 하지만 때로는 분해도 한다.
